Matériel

Kit Brett

Le célèbre Kit d'analyse microbiologique pour la détection et la prévention des contaminations des vins par Brettanomyces évolue.

La période entre la fin de la fermentation alcoolique et la FML est critique pour l'apparition de contaminant car le vin n'est pas protégé par le soufre. Brettanomyces profite de cette période pour se développer si les conditions sont favorables.
Ces levures se développent alors activement et le vin nécessite un traitement qui sera fonction du niveau de population et de l'étape de vinification.

Seul un suivi analytique systématique des populations à l'aide du KitBrett permet de recueillir ces informations et de prendre les bonnes décisions au bon moment, avant l'apparition de problèmes. Ces suivis permettent aussi de mieux gérer le chai et d'éviter des assemblages malheureux.

Description du Kit Brett

Le Kit d'analyse microbiologique des vins rouge pour la détection des levures de contamination Brettanomyces contient tout le matériel nécessaire pour 40 analyses fiables.

On trouve :

40 seringues et flacons stériles pour assurer des prélèvements aseptiques,
40 pipettes stériles pour déposer précisément sur le milieu de culture le volume de vin à analyser,
5 étaleurs pour répartir le vin sur la gélose,
un quadrillage pour faciliter les comptages et les boîtes de Pétri pré coulées,stériles, contenant un milieu sélectif spécialement élaboré pour la détection de Brettanomyces dans les vins.

Attention, contient des antibiotiques, éviter le contact avec la peau, ne pas avaler.
Conservation des milieux stériles : 2 mois à température ambiante (16-20°C), 6 mois à 4°C.

Protocole d'analyse

Le prélèvement des échantillons doit être fait de façon stérile pour garantir la fiabilité des analyses.

Enlever la membrane de stérilité qui protége le milieu et marquer le nom de l'échantillon ainsi que la date de prélèvement sur la boîte.
Après homogénéisation, prélever 0,1 à 0,5 ml de l'échantillon à analyser (vin, lies...) à l'aide d'une pipette stérile (usage unique, 13 gouttes = 0,5 mL).
Ouvrir la boîte sous une flamme et étaler le vin sur la gélose.
Placer la boîte à l'étuve pendant 5-7 jours à 28°C. Pour 0,5 mL de vin étalé, si on observe 5 colonies, on estime que la concentration cellulaire de l'échantillon de départ est de 10 Unités Formant Colonie/mL (UFC/mL).

Le milieu de culture peut aussi être utilisé pour les analyses qualités des vins embouteillés ou des vins clairs en fin d'élevage avant mise.

Filtrer sous-vide en environnement stérile, 10 à 100 mL du vin à analyser, sur membrane de nitrocellulose 0,45 µm.
Déposez délicatement la membrane sur la surface de la gélose face imprégnée vers le haut.
Incubez la boîte à 28°C pendant 5-7 jours.

Interprétation des résultats

La taille, la forme, les bords, la couleur des colonies et la morphologie des levures caractérisent Brettanomyces : petite colonie blanche, lisse, crémeuse apparaissant tardivement. Certaines colonies de Brettanomyces sont capables de fixer la couleur, et peuvent apparaître rouges. Un examen au microscope des colonies (grossissement 100 et 400) permet une bonne reconnaissance. La présence d'un précurseur aromatique dans le milieu de culture permet une reconnaissance olfactive. Ainsi, si Brettanomyces se développe sur le milieu (>20 colonies), les boîtes présenteront une odeur épicée ou animal caractéristique.

Pour la mise en place de ces suivis de population de Brettanomyces dans votre cave, nous vous proposons aussi des formations et du conseil annuel : optimisation des analyses microbiologiques, gestion du SO2, optimisation de l'hygiène de cave, audit complet…